CAR-T疗法的“通用”之路：探究UCAR-T扩增策略与设计思路

因此近几年，通用型CAR-T细胞疗法也在细胞治疗领域掀起了研发热潮。然而，同种异体T细胞可能引起的移植免疫排斥反应始终限制着通用型CAR-T的发展，产品开发依然面临诸多挑战。

目前造成自体和通用型CAR-T细胞体内存续时间差异较大的直接原因就是宿主免疫系统对于异体细胞的排斥作用，相比于临床可控的GvHD，直接影响CAR-T细胞体内疗效发挥的HvGA无疑成为了通用型CAR-T发展过程中最大的障碍。目前改善HvGA的策略主要包括免疫清除或抑制，免疫逃逸以及HLA匹配方法。

免疫清除或抑制

首先可以从CAR-T输注前的预处理方案着手，通用型CAR-T细胞比自体CAR-T细胞需要更加强烈的清淋措施，以给予异体CAR-T足够的存活和扩增时间。Cellectis公司通过在清淋方案中添加CD52单抗进一步清除患者自身的T细胞，临床研究结果证实给予CD52单抗的患者组相较于正常清淋组别呈现出更优的治疗效果。

但是这种高强度的淋巴细胞耗竭可能给患者带来额外的感染风险，T细胞和NK细胞的持续缺乏甚至会威胁生命。因而最理想的免疫抑制策略是可以抑制免疫排斥反应，但保留部分免疫保护。

免疫逃逸

另一种改善HvGA的策略是通过基因编辑手段帮助异体CAR-T细胞逃避宿主免疫细胞的识别及清除。供体T细胞表面的HLA-I类分子是宿主T细胞免疫排斥的关键介质，基于所有HLA-I类分子中都含有一个绝对保守的β2-微球蛋白（β2M），因此可以通过基因编辑通用型CAR-T细胞上的β2M，阻断HLA-I类分子的表达，有效降低患者T细胞的免疫排斥作用。

为进一步防止NK细胞对异体CAR-T细胞的免疫排斥作用，可以使CAR-T细胞表达非经典HLA分子（如HLA-E和HLA-G），或过表达siglec 7和siglec 9配体，保护通用型CAR-T免受NK细胞的杀伤。

HLA匹配

使用HLA-A/B/DR位点为高频单倍体的纯合子供体生成通用型CAR-T产品库，即筛选与大多数人群HLA等位基因相匹配的T细胞来作为制备通用型CAR-T细胞的原材料，也为避免排斥提供了一种额外的可能性。

从CAR-T细胞的细胞组成以及CAR基因递送方式等方面入手，提高CAR-T细胞在体内的杀伤能力和持久性亦是通用型CAR-T的发展趋势之一。研究表明，CAR-T细胞终产品中低分化细胞干细胞样记忆型T细胞（TSCM）的比例与其体内扩增时间呈正相关，其对实现肿瘤的长期缓解至关重要。Juno Therapeutics发现CAR-T细胞产品中CD4+和CD8+组成比例为1:1时，治疗B-ALL患者可以达到更高的缓解率。同时，有别于传统CAR-T通过慢病毒或逆转录病毒将CAR基因随机插入T细胞基因组中，CRISPR Therapeutics通过基因编辑手段联合腺相关病毒载体实现了CAR基因在TRAC基因座位的定点插入，可一步法制备通用型CAR-T产品，这种策略不仅增加了产品的一致性，而且降低了随机插入的致癌风险。

相比于自体CAR-T治疗，通用型CAR-T在细胞制备、质控、临床给药方面简化了细胞治疗的复杂程度，降低了产品成本，但同时也带来了新的挑战，也对安全性和特异性提出了更高的要求，同种异体T细胞可能引起的移植免疫排斥反应始终阻碍着通用型CAR-T的临床应用及发展。相比于目前已能够通过基因编辑、终产品质量检测等手段有效控制的GvHD安全风险，患者体内免疫细胞对于异体细胞的快速清除问题才是通用型CAR-T产品开发过程中最大的障碍，还有极大的发展空间。